RT-LEMPA kolormetrinė (liofilizuotas rutulys)
Šiame gaminyje yra reakcijos buferio, RT-Enzymes Mix (Bst DNR polimerazė ir karščiui atspari atvirkštinė transkriptazė), liofilizuotų apsauginių medžiagų ir chromogeninių dažų komponentų.Produktas yra liofilizuotas rutulinis, naudojamas tik su gruntais ir šablonais.Šis rinkinys užtikrina greitą ir aiškų vizualinį amplifikacijos aptikimą, kuri neigiama reakcija yra pažymėta raudona spalva, o teigiama reakcija nurodoma pakeitus geltona spalva.
Komponentas
RT-LAMP Colormetric Master Mix (liofilizuoti karoliukai)
Programos
DNR arba RNR izoterminiam amplifikacijai.
Laikymo sąlygos
Transportuojamas ir laikomas 2-8 ℃ temperatūroje.Prekė galioja 12 mėn.
protokolas
1.Išimkite atitinkamą skaičių liofilizuotų granulių miltelių pagal bandymų skaičių.
2.Paruoškite reakcijos mišinį
Komponentas | Apimtis |
RT-LAMP Colormetric Master Mix (liofilizuoti karoliukai) | 1 gabalas (2 karoliukai) |
10 × Grunto mišinysa | 5 μl |
DNR/RNR šablonai b | 45 μl |
Pastabos:
1. 10 × pradmenų mišinio koncentracija: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM kilpa F/B;
2. Nukleino rūgščių šablonus rekomenduojama ištirpinti naudojant DEPC vandenį.
3.Inkubuokite 65°C temperatūroje 30-45 min., kuri gali būti atitinkamai pratęsta, atsižvelgiant į spalvos pasikeitimą. Reakcijos laikas.
4.Žiūrint plika akimi, geltona buvo teigiama, o raudona – neigiama.
Pastabos
1.Reakcijos temperatūra gali būti optimizuota nuo 62 ℃ iki 68 ℃, atsižvelgiant į pradmenų būklę.
2.Supakuoti reagentai neturi būti ilgą laiką veikiami oro.
3.Raudonos ir geltonos spalvos pasikeitimo reakcija priklauso nuo reakcijos sistemos pH pokyčio, prašome nenaudoti Tris nukleino rūgšties laikymo tirpalo, rekomenduojama naudoti ddH2O saugoma nukleorūgštis.
4.Eksperimentas turi būti atliekamas standartizuotu būdu, įskaitant reakcijos sistemos paruošimą, mėginio apdorojimą ir mėginio pridėjimą.
5.Siūloma paruošti reakcijos sistemą itin švarioje lentelėje ir įdėti šablonus į kitų patalpų garų gaubtą, kad būtų išvengta netikrų.