Viruso DNR/RNR ekstrahavimo rinkinys
Rinkinys (HC1009B) gali greitai išgauti didelio grynumo virusines nukleino rūgštis (DNR/RNR) iš įvairių skystų mėginių, tokių kaip kraujas, serumas, plazma ir tamponų plovimo skystis, kad būtų galima apdoroti didelio našumo lygiagrečius mėginius.Rinkinyje naudojami unikalūs įterpti superparamagnetiniai silicio pagrindo magnetiniai karoliukai.Unikalioje buferinėje sistemoje nukleino rūgštys, o ne baltymai ir kitos priemaišos, adsorbuojamos vandeniliniais ryšiais ir elektrostatiniu ryšiu.Magnetiniai rutuliukai, kuriuose yra adsorbuotos nukleino rūgštys, nuplaunami, kad būtų pašalinti likę baltymai ir druskos.Naudojant mažai druskos turintį buferį, nukleorūgštys išsiskiria iš magnetinių granulių, kad būtų pasiektas greito nukleino rūgščių atskyrimo ir gryninimo tikslas.Visas operacijos procesas yra paprastas, greitas, saugus ir efektyvus, o gautos nukleino rūgštys gali būti tiesiogiai naudojamos tolesniems eksperimentams, tokiems kaip atvirkštinė transkripcija, PGR, qPCR, RT-PGR, RT-qPCR, naujos kartos sekos nustatymas, biochip analizė, ir tt
Laikymo sąlygos
Laikyti 15-25 ℃ temperatūroje ir transportuoti kambario temperatūroje.
Programos
Kraujas, serumas, plazma, tamponų eliuentas, audinių homogenatas ir kt.
Eksperimento procesas
1. Pavyzdys apdorojimas
1.1 Virusams skystuose mėginiuose, tokiuose kaip kraujas, serumas ir plazma: ekstrahavimui naudojama 300 μl supernatanto.
2.2 Tamponų mėginiams: Įdėkite tamponų mėginius į mėginių ėmimo mėgintuvėlius, kuriuose yra konservavimo tirpalas, sumaišykite 1 minutę ir paimkite 300 μL supernatanto ekstrahavimui.
1.3 Virusams audinių homogenatuose, audinių mirkymo tirpaluose ir aplinkos mėginiuose: palaikykite mėginius 5–10 minučių ir paimkite 300 μl supernatanto ekstrahavimui.
2. Paruošimas paruošimasįdėtas reagentas
Iš rinkinio išimkite supakuotus reagentus, apverskite ir keletą kartų sumaišykite, kad magnetinės granulės vėl suspensuotų.Švelniai pakratykite plokštelę, kad reagentai ir magnetiniai rutuliukai nuslūgtų į duobutės dugną.Patvirtinkite plokštės kryptį ir atsargiai nuplėškite sandarią aliuminio foliją.
Δ Nuplėšdami sandarinimo plėvelę venkite vibracijos, kad neišsilietų skystis.
3. Veikimas automatasatic instrumentas
3.1 Įpilkite 300 μL mėginio į 96 gilių šulinių plokštelės 1 arba 7 stulpelių duobutes (atkreipkite dėmesį į efektyvią darbinio šulinio padėtį).Įvesties mėginio tūris yra suderinamas su 100-400 μL.
3.2 Įdėkite 96 šulinėlių gilių šulinių plokštelę į nukleorūgščių ekstraktorių.Uždėkite magnetinio strypo rankoves ir įsitikinkite, kad jos visiškai apgaubia magnetinius strypus.
3.3 Automatiniam ištraukimui nustatykite programą taip:
3.4 Po ekstrahavimo perkelkite eliuentą iš 96 gilių šulinių plokštelės 6 arba 12 stulpelių (atkreipkite dėmesį į efektyvią darbinio šulinio padėtį) į švarų centrifugos mėgintuvėlį, kuriame nėra nukleazės.Jei nepanaudosite iš karto, laikykite produktus -20 ℃ temperatūroje.
Pastabos
Tik moksliniams tyrimams.Nenaudoti diagnostikos procedūroms.
1. Išskirtas produktas yra DNR/RNR.Ypatingas dėmesys turėtų būti skiriamas tam, kad operacijos metu RNR nesuardytų RNazės.Naudojami indai ir mėginių ėmikliai turi būti tam skirti.Visi mėgintuvėliai ir pipetės antgaliai turi būti sterilizuoti ir be DNazės/RNazės.Operatoriai turi mūvėti pirštines ir kaukes be pudros.
2. Prieš naudodami atidžiai perskaitykite naudojimo instrukciją ir naudokite griežtai pagal instrukcijų vadovą.Mėginiai turi būti apdorojami itin švariame stende arba biologinės saugos spintoje.
3. Automatinė nukleorūgščių ekstrahavimo sistema turi būti dezinfekuojama UV spinduliais 30 min. prieš ir po naudojimo.
4. Po ekstrahavimo eliuente gali likti magnetinių granulių pėdsakų, todėl venkite aspiruoti magnetinių granulių.Jei magnetiniai karoliukai yra aspiruojami, juos galima nuimti magnetiniu stovu.
5. Jei nėra specialių nurodymų skirtingoms reagentų partijoms, nemaišykite jų ir įsitikinkite, kad rinkiniai bus naudojami per galiojimo laikotarpį.
6. Tinkamai išmeskite visus mėginius ir reagentą, kruopščiai nuvalykite ir dezinfekuokite visus darbinius paviršius 75 % etanoliu.
