Poli A nešiklio RNR

Katės Nr.: HC4001A

Poli A, poliadenilatas, yra 100 ~ 10 000 poliadenilatų mišinys, polimerizuojamas polinukleotido fosforilaze in vitro.In vivo poli (a) pridedamas prie mRNR 3-galo fermentu, siekiant pagerinti mRNR stabilumą.Taikant nukleino rūgščių ekstrakciją, pridedant poli A į lizatą arba rišamąjį tirpalą, gali padidėti DNR ir RNR išeiga.Mechanizmaspoli A, pagerinantis nukleino rūgšties išeigą, yra toks:

1. Prisotintas kontaktas su gaminių paviršiaus adsorbcija.Daugumos polipropileno gaminių paviršiuje yra statinė elektros energija, kuri adsorbuoja nukleino rūgštis.Nešiklio RNR gali juos prisotintiadsorbcijos poveikį ir sumažinti tikslinių nukleorūgščių praradimą.

2. Inaktyvuoti pėdsakų nukleazes: Biologiniuose mėginiuose yra įvairių nukleazių iraplinką.Poli A gali inaktyvuoti pėdsakus nukleazėse ekstrahavimo arba konservavimo etapuosepagerinti tikslinių nukleorūgščių išeigą ir stabilumą.

3. Bendras nusodinimas. Nukleino rūgščių gryninimo stadijoje, kai nusodinama ar surišama su alkoholiu, poli A gali nusodinti kartu su tiksline nukleorūgštimi arba sudaryti polimero daleles.pagerinti atsigavimą.

Naudojimo būdas

Paimkite atitinkamą kiekį liofilizuotų miltelių, įpilkite DEPC apdoroto vandens arba guanidino druskos tirpaloištirpinkite jį 0,1–1 ug/ul, tada supakuokite ir laikykite -20°C temperatūroje.

Programos

1. Viruso DNR/RNR ekstrahavimas: į lizatą pridėjus 1–5 ug nešiklio RNR, galima pagerinti RNR/DNR išeigą, stabilizuoti tikslinę nukleorūgštį ir išvengti išgrynintos nukleino rūgšties skilimo saugojimo metu.

2. Mikro DNR/RNR ekstrahavimo kolonėlės membranos metodu (<1 ug) nešiklio RNR pridėjimas į 1-5 ug padeda pagerinti nukleino rūgšties išeigą.

3. Alkoholio sąlygojamoje nukleino rūgščių nusodinimo ir koncentravimo stadijoje 1-2 ug nešiklio RNR yra naudinga siekiant pagerinti trumpo segmento RNR atkūrimą.

4. Kiekybinio zondo PGR reakcijos tirpale į reakcijos tirpalą įdedant 10-100 ng nešiklio RNR, padeda pagerinti jautrumą ir sumažinti C._Tvertė.