2 × PCR Super Mix (su dažais)
2 × PCR pagrindiniame mišinyje yra Taq DNR polimerazės, dNTP ir kitų PGR reikalingų komponentų.„Master Mix“ yra stabilus 3 mėnesius esant 4 ° C temperatūrai su mūsų pritaikytais stabilizatoriais.Išankstinio mišinio tirpalas yra optimizuotas įprastinei PGR ir paruoštas naudoti, pridedant DNR šabloną ir pradmenų.PGR produktai gali būti tiesiogiai įkeliami elektroforezei naudojant iš anksto įdėtus bromfenolio mėlynojo dažus.Amplifikuotuose produktuose yra 3'-dA išsikišimas ir juos galima lengvai klonuoti į T vektorių.2×PCR Master Mix supaprastina PGR procedūrą ir sumažina užteršimą.
Laikymo sąlygos
Produktai turi būti laikomi -25 ℃ ~ -15 ℃ temperatūroje 2 metus.
Specifikacijos
| Ištikimybė (palyginti su Taq) | 1× |
| Karšta pradžia | No |
| Iškyša | 3'-A |
| Polimerazė | Taq DNR polimerazė |
| Reakcijos formatas | SuperMix arba Master Mix |
| Reakcijos greitis | Standartinis |
| produkto tipas | PCR pagrindinis mišinys (2x) |
Instrukcijos
1.Reakcijos sistema
| Komponentai | Apimtis(μL) |
| DNR šablonas | Tinka |
| 1 gruntas (10 μmol/L) | 2 |
| Gruntas 2 (10 μmol/l) | 2 |
| 2 × PCR pagrindinis mišinys | 25 |
| ddH2O | iki 50 |
2.Stiprinimo protokolas
| Ciklo žingsniai | Temperatūra (°C) | Laikas | Ciklai |
| Pradinė denatūracija | 94 | 5 min | 1 |
| Denatūravimas | 94 | 30 sek | 35 |
| Atkaitinimas | 50-60 | 30 sek | |
| Pratęsimas | 72 | 30-60 sek./kb | |
| Galutinis pratęsimas | 72 | 10 min | 1 |
Pastaba:
1) Šablonų naudojimas: 50-200 ng genominės DNR;0,1-10 ng plazmidės DNR.
2) Mg2+koncentracija: Šiame produkte yra 3 mM MgCl2, tinka daugeliui PGR reakcijų.
3) Atkaitinimo temperatūra: žr. teorinę pradmenų Tm vertę.Atkaitinimo temperatūrą galima nustatyti 2–5 ℃ žemesnę nei teorinė grunto vertė.
4) Pratęsimo laikas: molekuliniam identifikavimui rekomenduojama 30 sek./kb.Genų klonavimui rekomenduojama 60 sek./kb.
Pastabos
1.PGR produktai su 2× PCR Master Mix netinka poliakrilamido gelio elektroforezei.
2.Dėl savo saugumo ir sveikatos dirbdami dėvėkite laboratorinius chalatus ir vienkartines pirštines.
3.Jis naudojamas TIK moksliniams tyrimams!
