DNazė I (be Rnazės) (2 v/ul)
Katės Nr.: HC4007B
DNazė I yra endonukleazė, galinti virškinti viengrandę arba dvigrandę DNR.Jis gali hidrolizuoti fosfodiesterio ryšius, kad gautų mono- ir oligodeoksinukleotidus, turinčius 5'-fosfato grupę ir 3'-OH grupę.Optimalus darbinis DNazės I pH diapazonas yra 7-8.DNazės I aktyvumas priklauso nuo Ca2+ir gali būti aktyvuotas dvivalenčių metalų jonų, tokių kaip CO2, Mn2+, Zn2+ir tt Esant Mg2+, DNazė I gali atsitiktinai suskaidyti bet kurią dvigrandės DNR vietą;Nors dalyvaujant Mn2+, DNazė I gali suskaldyti DNR dvigrandę toje pačioje vietoje, sudarydama bukus galus arba lipnius galus, išsikišusius 1–2 nukleotidus.Jis gali būti naudojamas įvairių RNR mėginių apdorojimui.
Komponentai
vardas | 1KU | 5KU |
Rekombinantinė DNaseI (be Rnazės) | 500 μl | 5 × 500 μL |
DNazės I reakcijos buferis (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Laikymo sąlygos
Šis produktas turi būti laikomas -25–15 ℃ temperatūroje 2 metus.Venkite pakartotinio užšalimo ir atšildymo.
Instrukcijos
Taikoma DNR pašalinimui iš RNR mėginių tik nuoroda.
1. Norėdami paruošti šią reakcijos sistemą, naudokite centrifugos mėgintuvėlius ir pipetės antgalius, kuriuose nėra RNazės:
Komponentai | Tūris (μL) |
DNazės I reakcijos buferis (10×) | 1 |
Rekombinantinis DNazelis (be Rnazės) | 1 |
RNR | X |
DdH be RNazės2O | Iki 10 |
2. Reakcijos sąlygos yra tokios: 37 ℃, po 15-30 min., įpilkite galutinės koncentracijos 2,5 mM EDTA tirpalo ir gerai išmaišykite, tada 65 ℃ 10 min.Apdorotas šablonas gali būti naudojamas tolesniems RT-PGR arba RT-qPCR eksperimentams ir kt.
Pastabos
1. DNazė l jautri fizinei denatūracijai;Maišydami švelniai apverskite mėgintuvėlį irgerai suplakti, stipriai nekratyti.
2. Naudojamas fermentas turi būti laikomas ledo dėžutėje arba ledo vonioje, o panaudojus iškart -20 ℃ temperatūroje.
3. Šis produktas skirtas tik moksliniams tyrimams.
4. Dėl savo saugumo dirbkite su laboratoriniais chalatais ir vienkartinėmis pirštinėmis.