Peroksidazė (krienų šaltinis) Sinonimas: vandenilio peroksido oksidoreduktazė;HRP
apibūdinimas
Krienų peroksidazė (HRP) yra išskirta iš krienų (Amoracia rusticana) šaknų ir priklauso feroprotoporfirinų peroksidazių grupei.HRP lengvai susijungia su vandenilio peroksidu (H2O2).Gautas [HRP-H2O2] kompleksas gali oksiduoti daugybę vandenilio donorų:
Donoras + H2O2 → Oksiduotas donoras + 2 H2O
HRP oksiduos įvairius substratus (žr. 1 lentelę):
• Chromogeninis
• Chemiliuminescencinis (pvz., luminolis arba izoluminolis)
• Fluorogeninės (pvz., tiraminas, homovanilo rūgštis arba 4-hidroksifenilacto rūgštis)
HRP yra vienos grandinės polipeptidas, kuriame yra keturi disulfidiniai tilteliai.HRP yra glikoproteinas, kuriame yra 18% angliavandenių.Priklausomai nuo konkretaus izofermento, angliavandenių sudėtį sudaro galaktozė, arabinozė, ksilozė, fukozė, manozė, manozaminas ir galaktozaminas.
HRP yra plačiai naudojama imunoglobulinų etiketė daugelyje skirtingų imunochemijos programų, įskaitant imunoblotingą, imunohistochemiją ir ELISA.HRP gali būti konjuguotas su antikūnais keliais skirtingais metodais, įskaitant glutaraldehidą, perjodato oksidaciją, per disulfidinius ryšius, taip pat per amino ir tiolio nukreiptus kryžminius ryšius.HRP yra labiausiai pageidaujama antikūnų žyma, nes ji yra mažiausia ir stabiliausia iš trijų populiariausių fermentų žymenų (peroksidazės, β-galaktozidazės, šarminės fosfatazės), o jo glikozilinimas lemia mažesnį nespecifinį prisijungimą.Paskelbta glutaraldehido ir periodato konjugacijos metodų apžvalga.
Peroksidazė taip pat naudojama gliukozės4 ir peroksidų kiekiui tirpale nustatyti.Keliose publikacijose, 6–24 tezėse, 25–29 ir 30–46 disertacijose buvo cituojamas P8375 naudojimas savo tyrimų protokoluose.
Cheminė struktūra
Specifikacija
Bandomieji elementai | Specifikacijos |
apibūdinimas | Raudonai rudi amorfiniai milteliai, liofilizuoti |
Veikla | ≥100 V/mg |
Grynumas (SDS-PAGE) | ≥90 % |
Tirpumas (10 mg miltelių/ml) | Aišku |
Užteršti fermentai | |
NADH/NADPH oksidazė | ≤0,1 % |
Katalazė | ≤0,005 % |
ATPazė | ≤0,03 % |
Transportavimas ir sandėliavimas
Transportas:Siunčiama žemesnėje nei 2-8°C temperatūroje
Saugykla:Laikyti -20°C (ilgai), 2-8°C (trumpai) temperatūroje
Rekomenduojamas pakartotinis testasGyvenimas:2 metai