Multiplex One Step RT-qPCR premiksas
apibūdinimas
Katės Nr.: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix yra daugialypis kiekybinis PGR rinkinys, pagrįstas RNR kaip šablonu.Eksperimento metu atvirkštinė transkripcija ir kiekybinė PGR atliekama tame pačiame reakcijos mėgintuvėlyje, supaprastinant eksperimentinę operaciją ir sumažinant užteršimo riziką.Unikali buferio ir fermentų mišinio konstrukcija gali būti naudojama vienpakopėje liofilizuotoje sistemoje.Rinkinyje naudojama karščiui atspari atvirkštinė transkriptazė, skirta efektyviai pirmosios grandinės cDNR sintezei naudojant karštosios paleidimo Taq DNR polimerazę kiekybiniam amplifikavimui.Jame yra optimizuotas reakcijos buferis, fermentų mišinys ir t. t., taip pat buvo įtraukti veiksniai, kurie veiksmingai slopina nespecifinį PGR amplifikaciją ir padidina kelių qPCR reakcijų amplifikacijos efektyvumą, leidžiantį atlikti daugybinį kiekybinį fluorescencinį amplifikaciją, tuo pačiu užtikrinant pradmenų amplifikacijos efektyvumą.
Komponentai
| vardas |
| 1. Lio-buferis |
| 2. Lio-fermentų mišinys |
| 3. Lio apsauga |
Transportavimo sąlygosjonų
A: Lio buferis ir apsauginė medžiaga: -25 ~ -15 ℃, galiojimo laikas yra 1 metai.
B: Liofermentų mišinys, 2-8 ℃, tinkamumo laikas yra 6 mėnesiai.
Eksploatavimo instrukcija
1. Reakcijos sistema (paimkite 25 μL kaip pavyzdį)
| Komponentai | Tūris (μL) | Galutinė koncentracija |
| Lyo-buferis | 6 | 1* |
| Lio-fermentų mišinys | 1 | - |
| Lyo protektorius | 8 | - |
| Grunto mišinys (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Zondų mišinys (10 μM) | 0.5 | 0,05-0,5 uM |
| RNR šablonas | 5 | - |
| DEPC H2O | Iki 25 | - |
2. Optimizuotas dviračių protokolas
1) Standartinis dviračių protokolas
| Reakcijos stadija | Temperatūra | Laikas | Ciklas | |
| 1 | Atvirkštinė transkripcija | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Pradinė denatūracija | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikacijos reakcija | 95°C | 15 sek | 45 ciklai |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Greito važiavimo dviračiu protokolas
|
| Reakcijos stadija | Temperatūra | Laikas | Ciklas |
| 1 | Atvirkštinė transkripcija | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Pradinė denatūracija | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifikacijos reakcija | 95°C | 1 sekundė |
45 ciklai |
| 60°Cb | 13 sekc |
Pastaba:
a) Atvirkščiai transkripcija: Temperatūra gali būti 42°C arba 50°C 10-15 minučių.
b) Amplifikacijos reakcija: Temperatūra reguliuojama pagal projektuojamų gruntų Tm reikšmę.
c)Fluorescencija signalas įsigijimas: Nustatykite eksperimentinę procedūrą pagal reikalavimusinstrumento vadovas.
Techninė informacija / specifikacijos
| Karšta pradžia | Integruotas karštas paleidimas |
| Aptikimo metodas | Pradmenų-zondo aptikimas |
| PGR metodas | Vieno žingsnio RT-qPCR |
| Mėginio tipas | RNR |
Pastabos
1. Šis produktas skirtas tik moksliniams tyrimams.
2. Dėvėkite reikiamas AAP, pvz., laboratorinį chalatą ir pirštines, kad užtikrintumėte savo sveikatą ir saugą!
